1. Finalidade: Este procedemento ten como obxectivo proporcionar un procedemento normalizado para as operacións asépticas e a protección de salas estériles.
2. Ámbito de aplicación: laboratorio de probas biolóxicas
3. Persoa responsable: probador de supervisor QC
4.Definición: Ningún
5. Precaucións de seguridade
Realizar estrictamente operacións asépticas para evitar a contaminación microbiana; Os operadores deben desactivar a lámpada UV antes de entrar na habitación estéril.
6.Proces
6.1. A habitación estéril debe estar equipada cunha sala de operacións estéril e unha sala de tampón. A limpeza da sala de operacións estéril debe alcanzar a clase 10000. A temperatura interior debe manterse a 20-24 ° C e a humidade debe manterse no 45-60%. A limpeza do banco limpo debe chegar á clase 100.
6.2. A habitación estéril debe manterse limpa e está estrictamente prohibido acumular restos para evitar a contaminación.
6.3. Evite estrictamente a contaminación de todos os equipos de esterilización e os medios de cultivo. Os que están contaminados deberían deixar de usalos.
6.4. A sala estéril debe estar equipada con desinfectantes de concentración de traballo, como a solución de cresol do 5%, o 70% de alcol, a solución de clormetionina do 0,1%, etc.
6.5. A habitación estéril debe esterilizarse regularmente e limpar con desinfectante adecuado para asegurarse de que a limpeza da sala estéril cumpre os requisitos.
6.6. Todos os instrumentos, instrumentos, pratos e outros elementos que deben ser introducidos na habitación estériles deben ser envoltos e esterilizados mediante métodos apropiados.
6.7. Antes de entrar na habitación estéril, o persoal debe lavarse as mans con xabón ou desinfectante e, a continuación, cambiar en roupa de traballo especial, zapatos, sombreiros, máscaras e luvas na sala de tampón (ou limpar as mans de novo con 70% de etanol) antes de entrar na habitación estéril. Realiza operacións na cámara bacteriana.
6.8. Antes de usar a habitación estéril, a lámpada ultravioleta na habitación estéril debe estar activada para a irradiación e esterilización durante máis de 30 minutos, e o banco limpo debe estar activado para soprar ao aire ao mesmo tempo. Despois de completar a operación, a habitación estéril debe limparse a tempo e logo esterilizar a luz ultravioleta durante 20 minutos.
6.9. Antes da inspección, o envase exterior da mostra de proba debe manterse intacto e non se debe abrir para evitar a contaminación. Antes da inspección, use 70% de bolas de algodón de alcol para desinfectar a superficie exterior.
6.10. Durante cada operación, debe facerse un control negativo para comprobar a fiabilidade da operación aséptica.
6.11. Ao absorber o líquido bacteriano, debes usar unha bola de succión para absorbela. Non toques a palla directamente coa boca.
6.12. A agulla de inoculación debe ser esterilizada por chama antes e despois de cada uso. Despois do arrefriamento, a cultura pódese inocular.
6.13. As pallas, os tubos de ensaio, os pratos Petri e outros utensilios que conteñen líquido bacteriano deben empaparse nunha cubeta de esterilización que conteña unha solución de lisol do 5% para a desinfección e sacada e lavada despois de 24 horas.
6.14. Se hai líquido bacteriano vertido na mesa ou no chan, debes verter inmediatamente un 5% de solución de ácido carbólico ou un 3% de lisol na zona contaminada durante polo menos 30 minutos antes de tratalo. Cando a roupa de traballo e os sombreiros están contaminados con fluído bacteriano, deberían ser eliminados inmediatamente e lavados despois da esterilización de vapor de alta presión.
6.15. Todos os elementos que conteñen bacterias vivas deben ser desinfectados antes de ser lavados baixo a billa. Está estrictamente prohibido contaminar a alcantarilla.
6.16. O número de colonias en sala estéril debe comprobarse mensualmente. Co banco limpo aberto, toma unha serie de pratos Petri estériles cun diámetro interno de 90 mm e inxectan asépticamente uns 15 ml de medio de cultivo de ágar de nutrientes que se derreteu e arrefriouse a uns 45 ° C. Despois da solidificación, colócase de cabeza entre 30 e 35 incubados durante 48 horas nunha incubadora ℃. Despois de demostrar a esterilidade, toma de 3 a 5 placas e colócaas na esquerda, media e dereita da posición de traballo. Despois de abrir a tapa e expoñelos durante 30 minutos, colócaos de cabeza nunha incubadora de 30 a 35 ° C durante 48 horas e sácaas. examinar. O número medio de bacterias diversas na placa nunha superficie limpa de clase 100 non excederá a 1 colonia e o número medio dunha clase 10000 limpa non exceda de 3 colonias. Se se supera o límite, a sala estéril debe desinfectarse completamente ata que as inspeccións repetidas cumpran os requisitos.
7. Consulte o capítulo (método de inspección de esterilidade) nos "métodos de inspección hixiénica de drogas" e "Prácticas operativas estándar de China para a inspección de drogas".
8. Departamento de distribución: Departamento de Xestión da Calidade
Orientación técnica da sala limpa:
Despois de obter un ambiente estéril e materiais estériles, debemos manter un estado estéril para estudar un microorganismo coñecido específico ou utilizar as súas funcións. Se non, varios microorganismos desde fóra poden mesturarse facilmente. O fenómeno da mestura de microorganismos irrelevantes desde fóra chámase bacterias contaminantes na microbioloxía. Prevenir a contaminación é unha técnica crítica no traballo microbiolóxico. A esterilización completa por un lado e a prevención da contaminación por outra son dous aspectos da técnica aséptica. Ademais, debemos evitar os microorganismos en estudo, especialmente os microorganismos patóxenos ou os microorganismos deseñados xeneticamente que non existen na natureza, desde escapar dos nosos envases experimentais a un ambiente externo. Para estes fins, en microbioloxía, hai moitas medidas.
A sala estéril adoita ser unha pequena habitación especialmente creada no laboratorio de microbioloxía. Pódese construír con follas e vidro. A área non debe ser demasiado grande, uns 4-5 metros cadrados e a altura debe ser de aproximadamente 2,5 metros. Debe configurarse unha sala de tampón fóra da habitación estéril. A porta da sala de tampón e a porta da habitación estéril non deben enfrontarse á mesma dirección para evitar que o fluxo de aire traia bacterias diversas. Tanto a habitación estéril como a sala de tampón deben ser herméticas. Os equipos de ventilación interior deben ter dispositivos de filtración de aire. O chan e as paredes da habitación estéril deben ser suaves, difíciles de albergar a sucidade e fáciles de limpar. A superficie de traballo debe estar a nivel. Tanto a habitación estéril como a sala de tampón están equipadas con luces ultravioletas. As luces ultravioletas na habitación estéril están a 1 metro da superficie do traballo. O persoal que entra na habitación estéril debe levar roupa esterilizada e sombreiros.
Actualmente, existen salas estériles nas fábricas de microbioloxía, mentres que os laboratorios xerais usan banco limpo. A función principal do banco limpo é usar o dispositivo de fluxo de aire laminar para eliminar varios pequenos po, incluíndo microorganismos na superficie de traballo. O dispositivo eléctrico permite que o aire pase a través do filtro HEPA e logo introduza a superficie de traballo, de xeito que a superficie de traballo sempre se mantén baixo o control do aire estéril que flúe. Ademais, hai unha cortina de aire de alta velocidade no lado preto do exterior para evitar que entra o aire bacteriano externo.
En lugares con condicións difíciles, tamén se poden usar caixas estériles de madeira no canto do banco limpo. A caixa estéril ten unha estrutura sinxela e é fácil de mover. Hai dous buracos na parte dianteira da caixa, que están bloqueados por portas de pulsación cando non están en funcionamento. Podes estender os brazos durante a operación. A parte superior da parte dianteira está equipada con vidro para facilitar o funcionamento interno. Hai unha lámpada ultravioleta dentro da caixa e pódense introducir utensilios e bacterias a través dunha pequena porta do lado.
As técnicas de funcionamento asépicas actualmente non só xogan un papel fundamental na investigación e aplicacións microbiolóxicas, senón que tamén son moi utilizadas en moitas biotecnoloxías. Por exemplo, tecnoloxía transxénica, tecnoloxía de anticorpos monoclonais, etc.
Tempo de publicación: MAR-06-2024